猴細(xì)胞周期素D1(CCND1)ELISA試劑盒  

實(shí)驗(yàn)原理

1. 抗體或抗原的吸附：將待測(cè)抗原或抗體吸附到固相載體上，常用的載體有微孔板、玻璃纖維、聚苯乙烯等。這些載體表面具有特殊的化學(xué)基團(tuán)，能夠與待測(cè)抗原或抗體特異性結(jié)合。

2. 酶標(biāo)記的抗體或抗原的結(jié)合：將酶標(biāo)記的抗體或抗原與待測(cè)抗原或抗體結(jié)合，形成酶標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物。酶標(biāo)記的抗體或抗原具有高度的特異性和親和力，能夠與待測(cè)抗原或抗體形成穩(wěn)定的復(fù)合物。

3. 底物顯色反應(yīng)：當(dāng)酶標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物與底物溶液接觸時(shí)，酶能夠催化底物分解，產(chǎn)生顏色變化。通過(guò)測(cè)量顏色的變化程度，可以判斷待測(cè)抗原或抗體的濃度。

猴細(xì)胞周期素D1(CCND1)ELISA試劑盒  

樣本處理

1.組織取出前盡量進(jìn)行心臟灌流

2.組織表面不能有毛發(fā)等不相關(guān)組分

3.組織稱重(mg)后立即放入EP管中

4.向EP管中加入9倍量的PBS (μL)

5.用勻漿機(jī)進(jìn)行組織勻漿

6.離心

7.小心吸取上清

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 準(zhǔn)備試劑盒：將試劑盒從冰箱中取出，室溫放置30分鐘以上，使試劑盒恢復(fù)至室溫。

2. 加樣：分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和空白孔，每孔加入50μl。

3. 孵育：用封板膠紙封住反應(yīng)孔，輕輕振蕩混勻，37℃孵育1小時(shí)。

4. 洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌4-5次，每次30秒。

5. 加酶標(biāo)二抗：每孔加入50μl酶標(biāo)二抗溶液，輕輕振蕩混勻，37℃孵育30分鐘。

6. 洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液充分洗滌4-5次，每次30秒。

7. 加底物：每孔加入50μl底物溶液，輕輕振蕩混勻，37℃孵育15-20分鐘。

8. 終止反應(yīng)：每孔加入50μl終止液，輕輕振蕩混勻。

9. 讀數(shù)：用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處讀取各孔的光密度值。

標(biāo)本的稀釋原則：首先通過(guò)文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量，確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)，檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過(guò)程中，應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。計(jì)算濃度時(shí)，稀釋了“N"倍，標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N"。

標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。 如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

 生物su標(biāo)記抗體的稀釋原則：臨用前以生物su標(biāo)記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔100μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物su標(biāo)記抗體加990μl生物su標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。

辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔100μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。

注意事項(xiàng)

1. 實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本試劑盒的使用說(shuō)明，確保所有材料、器具和試劑準(zhǔn)備齊全。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，請(qǐng)務(wù)必遵循實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作，并注意控制實(shí)驗(yàn)條件的一致性。

3. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)勿觸摸酶標(biāo)板上的酶標(biāo)抗體區(qū)域，以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后請(qǐng)及時(shí)清洗并整理實(shí)驗(yàn)器具，避免交叉污染。

5. 本試劑盒僅供體外診斷使用，使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，如有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系廠家或?qū)I(yè)技術(shù)人員。

相關(guān)產(chǎn)品

（Shanghai Duoma Biotechnology Co. , Ltd is a domestic joint venture integrating scientific research and production as one of the specialized biological companies. We specialize in providing various imported brands, R&D and production of ELISA kits, cell strains, antibodies, consumables, culture media and other products, as well as technical services such as experimental outsourcing, technical guidance, operation guidance, experimentation and research. The company has a world-class R&D team, leading technology, cutting-edge R&D platform and modern production base to produce various scientific research products. We are sincerely grateful to scientists at home and abroad, scientific researchers and scholars at home and abroad for their strong support and understanding. In the future work, we will give full play to our advantages, dare to pioneer, independently innovate, dare to be pioneering and persevere, keep forging ahead on the road of life science, strive hard, aim at the frontier of international life science, and continuously innovate and develop new products. Provide better and more humanized services for scientific research.）