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猴晶體蛋白(CLC)酶聯(lián)免疫試劑盒
ELISA試劑盒的優(yōu)點
1. 特異性高:由于是抗原抗體的特異性結(jié)合,因此試驗的特異性很高,能夠排除其他物質(zhì)的干擾。
2. 靈敏度高:由于酶的放大作用,使得試驗的靈敏度大大提高,能夠檢測出微量的抗原或抗體。
3. 操作簡便:ELISA試驗操作相對簡單,容易掌握,適合于大規(guī)模樣本檢測。
4. 適用范圍廣:可以用于檢測各種抗原、抗體和激素等生物分子。
實驗原理
酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一種基于抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)檢測方法。其基本原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合,通過酶對底物反應(yīng)的顯色反應(yīng),對樣本中的待測物質(zhì)進(jìn)行定量或定性分析。ELISA方法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡便、適用范圍廣等特點,因此在生物醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷和食品安全檢測等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。
實驗注意事項
1. 抗原和抗體的儲存:應(yīng)嚴(yán)格按照說明書要求存放抗原和抗體,避免反復(fù)凍融和長時間暴露在高溫環(huán)境中。同時要保證試劑盒未過期,以獲得可靠的實驗結(jié)果。
2. 加樣技術(shù):加樣時應(yīng)保證加入的體積準(zhǔn)確且不產(chǎn)生氣泡,避免加在孔壁的邊緣,以免影響與固相表面的接觸。加樣時應(yīng)在每孔的旁邊放置一個加樣對照孔,以監(jiān)測加樣的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。
3. 溫育:溫育是ELISA實驗中的重要步驟,溫育時間和溫度的控制對于抗原抗體反應(yīng)的進(jìn)行和結(jié)果的影響至關(guān)重要。必須嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行溫育,并注意保持恒溫狀態(tài)。
4. 洗滌:洗滌是ELISA實驗中的一步,它可以去除未結(jié)合的物質(zhì),提高檢測的特異性和靈敏度。洗滌時應(yīng)保證每次洗滌時間充足,并更換洗滌液以保證洗滌效果。同時要避免在洗滌過程中產(chǎn)生氣泡,以免影響洗滌效果。
猴晶體蛋白(CLC)酶聯(lián)免疫試劑盒
準(zhǔn)備工作
1.孔板室溫平衡1小時
2.做好布板圖譜
3.樣本解凍
4.準(zhǔn)備各型號的移液槍、槍頭、量筒
5.準(zhǔn)備雙蒸水
6.根據(jù)樣本量配好樣本xi釋液
7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液
8.若需要提前設(shè)置好振板器、洗板器
9.準(zhǔn)備足夠量的擦手紙
10.根據(jù)說明書提示,溶解標(biāo)準(zhǔn)品
11.配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品
12.配制質(zhì)控品
13.根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果稀釋樣本
14.準(zhǔn)備好封板膜
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實驗步驟
1. 準(zhǔn)備試劑盒:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘以上,使試劑盒恢復(fù)至室溫。
2. 加樣:分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和空白孔,每孔加入50μl。
3. 孵育:用封板膠紙封住反應(yīng)孔,輕輕振蕩混勻,37℃孵育1小時。
4. 洗滌:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
5. 加酶標(biāo)二抗:每孔加入50μl酶標(biāo)二抗溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育30分鐘。
6. 洗滌:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌4-5次,每次30秒。
7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,輕輕振蕩混勻,37℃孵育15-20分鐘。
8. 終止反應(yīng):每孔加入50μl終止液,輕輕振蕩混勻。
9. 讀數(shù):用酶標(biāo)儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值。
結(jié)果分析
根據(jù)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品濃度及對應(yīng)的OD值,利用標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,通過計算得到待測樣品的濃度。
售后
試劑盒售后:本公司出售的試劑盒均保質(zhì)保量,質(zhì)量問題均可免費退換,另提供免費代測服務(wù)。
細(xì)胞售后:
1、細(xì)胞運輸丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2、細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照,未告知的視為產(chǎn)品合格。4-10天內(nèi)出現(xiàn)問題,請?zhí)峁┘?xì)胞照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題的照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟,并跟我公司人員及時溝通判定是否重發(fā),具體可以參照我或者隨貨說明書相關(guān)售后條款。
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